核仁是細胞核里有著重要功能的無膜特殊結(jié)構(gòu),在顯微鏡下呈現(xiàn)直徑約為0.5-5微米的球狀結(jié)構(gòu)。它就像“超級工廠”一樣,每個“小車間”通過流水線高效聯(lián)系,將新生的核糖體RNA運入內(nèi)部的“包裝站”,完成核糖體組裝,功能復(fù)雜而又重要。
然而,已有的研究對于核仁內(nèi)大多數(shù)蛋白質(zhì)的精確定位和功能尚不清楚?!俺壒S”是如何將復(fù)雜的結(jié)構(gòu)協(xié)同起來發(fā)揮作用的?3月9日,中國科學(xué)院分子細胞科學(xué)卓越創(chuàng)新中心陳玲玲研究組在國際學(xué)術(shù)期刊《自然》上發(fā)表的研究論文對核仁內(nèi)的蛋白質(zhì)進行定位篩選,通過超高分辨成像對200種蛋白質(zhì)在這個“超級工廠”內(nèi)的定位進行了詳細研究,揭示出核仁這一“超級工廠”內(nèi)部的精細結(jié)構(gòu)。
過去的研究認為核仁由三部分組成:纖維中心(FC)是核心,由致密纖維組分(DFC)包裹形成更大的球體,多個FC/DFC單元鑲嵌在同一顆粒組分(GC)里。研究組在核仁原本的三層結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上,又發(fā)現(xiàn)了一層包裹在DFC外的新球殼狀區(qū)域,并將其命名為致密纖維成分外側(cè)區(qū)域(PDFC)。如果將每個FC/DFC區(qū)域比作“小車間”,PDFC就是“監(jiān)測站”,新生的核糖體RNA還需要通過PDFC這個“監(jiān)測站”才能完成最后的核糖體組裝。
進一步研究發(fā)現(xiàn),定位于PDFC“監(jiān)測站”的URB1蛋白質(zhì)是調(diào)控新生核糖體RNA 尾端折疊和加工的關(guān)鍵。URB1蛋白質(zhì)具有分子量大,流動慢的特征。它仿佛一個體型龐大的“哨兵”,“看守”在PDFC區(qū)域,結(jié)合到由“小車間”運輸而來的新生核糖體RNA尾端,與其他因子一起工作,去除末端。該過程對于核糖體RNA的成熟和核糖體的組裝至關(guān)重要:末端剪切完成的核糖體RNA就會被URB1“哨兵”放行,參與下一步核糖體組裝;一旦URB1“哨兵”消失,核糖體RNA就會帶著未剪切的尾端涌入GC區(qū)域,造成混亂,使得細胞無法正常運作,同時也會引來外切酶體復(fù)合物的“鎮(zhèn)壓”。
在動物實驗中,研究人員觀察到,缺失了URB1蛋白質(zhì)的斑馬魚會產(chǎn)生頭面部發(fā)育的畸形,無法成活。而URB1蛋白質(zhì)缺失的小鼠胚胎則無法著床,引發(fā)早期死亡。
此項研究工作發(fā)現(xiàn)了PDFC這一全新結(jié)構(gòu),通過解析其中URB1的功能,揭示了核仁多層結(jié)構(gòu)與核糖體RNA加工、核糖體組裝的相互協(xié)同作用,為研究核仁作為核糖體RNA“加工廠”的高效運轉(zhuǎn)與質(zhì)控機制提供了全新的見解,也為核仁組裝和在胚胎發(fā)育中的潛在影響提供了新的研究思路。
分子細胞卓越中心陳玲玲研究組博士研究生單琳和許光(現(xiàn)為麻省理工學(xué)院博士后)為該論文的共同第一作者,分子細胞卓越中心研究員、新基石研究員陳玲玲為該論文通訊作者。該工作得到復(fù)旦大學(xué)生物醫(yī)學(xué)研究院/復(fù)旦大學(xué)附屬兒童醫(yī)院楊力研究員、中國科學(xué)院分子細胞科學(xué)卓越創(chuàng)新中心李勁松研究員、清華大學(xué)俞立教授和北京協(xié)和醫(yī)院醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中心黃超蘭教授的大力幫助。同時得到分子細胞科學(xué)卓越創(chuàng)新中心細胞分析技術(shù)平臺、斑馬魚技術(shù)平臺、分子生物學(xué)技術(shù)平臺和浙江大學(xué)良渚實驗室的支持,以及來自中科院、基金委、科技部、上海市科委等部門的經(jīng)費資助。該課題還得到了科學(xué)探索獎的支持。
原載于光明日報客戶端 2023年3月11日
作者:顏維琦